北京臨床基因擴增檢驗實驗室籌建策劃方案

1. 基因擴增實驗室建設規范有哪些

SICOLAB實驗室建設一般採用標准：
SNT-1193-2003-基因檢驗實驗室技術要求
CNAS-GL029：2018 基因擴增領域檢測實驗室認可指南
衛生部印發的《醫療機構臨床實驗室管理辦法》
GB 50346-2011《生物安全實驗室建築技術規范》
WS 233-2002《微生物和生物醫學實驗室生物安全通用准則》

2. PCR實驗室規劃設計怎麼布局

SICOLAB這樣布局設計：
一、臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個分隔開的工作區域：
1、試劑貯存和准備區
2、標本制備區
3、擴增反應混合物配製和擴增區
4、擴增產物分析區
如使用全自動分析儀,區域可適當合並。
二、各工作區域必須有明確的標記，避免不同工作區域內的設備、物品混用。
三、進入各工作區域必須嚴格按照單一方向進行,即試劑貯存和准備區→標本制備區→擴增反應混合物配製和擴增區→擴增產物分析區。
SICOLAB實驗室整體設計建設工程、生物樣本庫建設工程、GMP環境建設工程、環保工程。

3. 臨床基因擴增實驗室的pcr驗收要准備哪些工作

臨床基因擴增實驗室的pcr驗收要准備哪些工作
摘要：為規范臨床基因擴增檢驗實驗室管理，保證臨床基因擴增檢驗質量，使臨床診斷和治療更為科學、合理，特製定本辦法。
關鍵詞：PCR 實驗室
臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法
第一章 總 則
第一條 為規范臨床基因擴增檢驗實驗室管理，保證臨床基因擴增檢驗質量，使臨床診斷和治療更為科學、合理，特製定本辦法。
第二條 臨床基因擴增檢驗技術指以臨床診斷治療為目的，以擴增檢測DNA或RNA為方法的檢測技術，如聚合酶鏈反應（PCR）、連接酶鏈反應（LCR）、轉錄依賴的放大系統（TAS）自主序列復制系統（3SR）和鏈替代擴增（SDA）等。
第三條 本辦法適用於開展臨床基因擴增檢驗的實驗室。臨床基因擴增檢驗實驗室設立在二級以上醫院。
第四條 臨床基因擴增檢驗實驗室必須使用經國家葯品監督管理局批準的臨床檢驗試劑開展臨床基因擴增檢驗項目。
第五條 衛生部臨床檢驗中心（以下簡稱衛生部臨檢中心）和省、自治區、直轄市臨床檢驗中心（以下簡稱省臨檢中心）負責對所轄行政區域內臨床基因擴增檢驗實驗室的質量監督管理工作。
第二章 實驗室設置和驗收
第六條 擬設置臨床基因擴增檢驗實驗室的醫療機構按照《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標准》（見附件）籌建實驗室；籌建完成後，由法定代表人向衛生部臨檢中心提出技術驗收申請。申請時需提交以下材料：
（一）《醫療機構執業許可證》復印件；
（二）可行性研究報告；
1、 擬設臨床基因擴增檢驗實驗室機構的所在地醫療衛生資源狀況、本機構的基本情況、對臨床基因擴增檢驗的需求以及臨床基因擴增實驗室運行的預測分析；
2、 擬設臨床基因擴增檢驗實驗室的設置平面圖；
3、 擬設臨床基因擴增檢驗實驗室將開展的檢驗項目、實驗設備條件和有關技術人員資料
第七條 衛生部臨檢中心和省臨檢中心共同組織相關專業的專家組（以下簡稱專家組），按照《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標准》對提出申請的臨床基因擴增檢驗實驗室進行技術驗收。驗收完成後，在20日內將驗收報告寄送至申請機構。
第八條 經專家組技術驗收合格的醫療機構將本辦法第六條規定的材料及專家組驗收報告送至省級行政部備案。在將符合規定的全部材料送達省級衛生行政部門後15日內未收到省級衛生行政部門不同意的意見，方可開展專家組技術驗收合格的臨床基因擴增檢驗項目。
第九條 未經專家組驗收合格並報省級衛生行政部門備案的醫療機構不得擅自開展臨床基因擴增檢驗項目。
第三章 實驗室監督管理
第十條 臨床基因檢驗實驗室必須按照《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范》（另發）開展臨床基因擴增檢驗工作。
第十一條 臨床基因擴增檢驗實驗室技術人員必須進行上崗培訓。經培訓合格者，由培訓單位發給合格證書，並將培訓合格人員名單報衛生部臨檢中心備案。獲得培訓合格證書者方可從事臨床基因擴增檢驗工作。
培訓單位為衛生部臨檢中心，或由省級衛生行政部門指定並經衛生部臨檢中心認定的機構。培訓時使用規定的統一教材。
第十二條 以科研為目的的基因擴增檢驗項目。不得向臨床出具檢驗報告，不得向病人收取任何費用。
第十三條 臨床基因擴增檢驗實驗室必須按照《臨床基因擴增實驗室工作規范》開展室內質量控制，並參加衛生部臨檢中心組織的室內質量評價。
第十四條 衛生部臨檢中心按照本方法和《臨床基因擴增實驗室工作規范》協調、組織省臨檢中心對臨床基因擴增檢驗實驗室的檢驗質量進行監測。監測結果報省級衛生行政部門，同時抄送被監測的臨床基因擴增檢驗實驗室所在醫療機構。
第十五條 衛生部臨檢中心或省級臨檢中心受省級以上衛生行政部門委託可對臨床基因擴增檢驗實驗室進行現場檢查，現場檢查工作人員在履行職責時應出示證件。在進行現場檢查時，檢查人員有權調閱有關資料，被檢查機構不得拒絕或隱瞞。
第十六條 衛生部臨檢中心對在室間質量評價中不合格的臨床基因擴增檢驗實驗室提出警告，對連續二次或三次中有二次發現臨床基因擴增檢驗結果不合格的臨床基因擴增檢驗實驗室，衛生部臨檢中心報省級以上衛生行政部門由省級以上衛生行政部門責令其暫停有關臨床基因擴增檢驗項目，限期整改。經專家組進行再次技術驗收並合格，並報省級衛生行政部門核准後，方可重新開展臨床基因擴增檢驗項目。
第十七條 對於未經衛生部臨檢中心組織的專家組技術驗收合格並報省級衛生部門備案，擅自開展臨床基因檢驗項目的醫療機構，由省級衛生行政部門依據《醫療機構管理條例》第四十七條和《醫療機構管理條例實施細則》第八十條予以處罰，並予以公告。公告所需費用由被公告機構支付。
第十八條 出現下列情況之一的臨床基因擴增檢驗實驗室，由省級衛生行政部門責令其停止開展臨床基因擴增檢驗，並對其所在醫療機構予以公告。公告所需費用由被公告機構支付：
（一） 開展超出衛生部臨檢中心組織的技術驗收合格並報省級衛生行政部門備案 臨床基因擴增檢驗項目的；
（二） 使用未經國家葯品監督管理局批準的試劑開展臨床基因擴增檢驗的；
（三） 在臨床基因擴增檢驗中未開展室內質量控制的；
（四） 在臨床基因擴增檢驗中未參加室間質量評價的；
（五） 在臨床基因擴增檢驗中弄虛作假的；
（六） 以科研為目的的基因擴增檢驗項目向病人收取費用的；
（七） 使用未經培訓合格的專業技術人員從事臨床基因擴增檢驗的；

4. 如何申報DNA實驗室 具體流程有哪些

DNA 實驗室不知道，但是PCR實驗室的認證是有法規要求的，可以參考的文件如下：可以在網站上自己下看看
<>醫學實驗室質量和能力認可准則>

<醫學實驗室質量和能力認可准則在基因擴增檢驗領域的應用說明CNAS-CL34>
臨床基因擴增檢驗實驗室工作規范
臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法
其他還有一些,可以參考對於生物實驗室應該是按照P1,P2,P3,P4的要求來審核的。

5. 如何設計建設標準的NGS實驗室

1、平面布局：

NGS實驗室的平面布局要從檢測項目、檢測技術平台、具體工作量這3方面來考慮，並且要遵守「工作有序、互不幹擾、防止污染、報告及時」的原則。

2、主體結構：

NGS實驗室建設所採用的主體材料為彩鋼板與鋁合金材料，室內的陰角與陽角採用鋁合金50內圓角鋁，這樣不僅能確保室內的結構牢固、密封性好，同時也不易污染、積塵。

3、各區分隔和氣壓調節：

NGS實驗室大體上分為試劑准備、樣本制備、PCR擴增、高通量測序這4個區域。再來看氣壓調節，要在實驗區的外牆和各扇門上安裝風量可調的回風口，空氣通過回風口向室內換氣。

4、地面：

NGS實驗室的地面必須耐腐蝕、易清潔，具有很好的整體性，因此PVC卷材地面或自流坪地面是不錯的選擇。如果預算有限，建議選擇水磨石地面或大塊的瓷磚。

5、消毒：

在NGS實驗室的實驗區、緩沖區頂部、傳送窗內部要配備用於消毒的紫外燈。如果要對實驗桌進行局部消毒，還要配備移動紫外線燈。

6、傳遞窗：

傳遞窗有機械連鎖型、電子連鎖型這2種，NGS實驗室建議配備機械連鎖型傳遞窗，以便確保樣本與試劑在傳遞過程中不會受到污染。

7、照明：

由於NGS實驗室內有潔凈度需求，因此相關照明設備必須不積塵、易清潔才行，這里建議配備凈化燈具。

6. 廈門市pcr實驗室報批流程

咨詢記錄 · 回答於2021-12-14

7. 基因檢測實驗室建設有哪些注意事項

1、試劑配製室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入，造成污染；可以通過控制進風風量大於排風風量達到正壓效果。
2、核酸擴增室及產物分析室應呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風風量大於進風風量達到負壓效果。
3、各個區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產生假性結果。
4、實驗室的牆體，包括頂棚，應結構牢固、氣密性好；所有陰角宜採用圓弧形線條過渡；牆體內壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
以上為喜格-總結的基因檢測實驗室建設的四點注意事項。

8. VOLAB醫院PCR實驗室規劃設計流程與要求有哪些

怎樣建立PCR實驗室
1、建立樣品准備區
這個區域專門用作樣品的准備，在制備和操作用於核酸提取的試劑時應該採取預防措施：⑴PCR產物和帶有要擴增序列的DNA克隆不能在這個房間操作。⑵組織培養物、組織標本和血清樣品都帶進樣品准備間處理，以根據應用的需要提取DNA或RNA。⑶用於樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷DNA樣品應該用有專門的防護或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應該用單獨包裝的無菌一次性移液管吸取。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產生，而且管子不能用力崩開，這樣會產生氣溶膠。⑺任何時候都應該穿實驗服和帶手套，手套要經常更換，尤其在抽提過程中每一步之間都要更換。實驗服要專門用於樣品准備間，經常清洗。
2、樣品准備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題，反轉錄一步可以在樣品准備區進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道。
3、建立前PCR區。
該去專門用於准備各種反應，這個區域必須保持干凈，而且沒有來自克隆和樣品准備的污染。前PCR區必須要有試劑和准備，特別是專門用於前PCR區的正壓活塞式移液管。
4、PCR實驗室試劑的操作。
⑴所用的所有溶液都應該沒有核酸和（或）核酸酶（DNase和RNase）污染。⑵所有PCR試劑中使用的水都應該是高質量的－新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過濾的，並且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴增反應。⑷所用試劑都應該以大體積配製，實驗一下看試劑是否滿意，然後分裝成僅夠一次使用的量進行貯存。⑸所有試劑和樣品准備過程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配製的試劑在用於准備新的標本之前應該加以檢驗。⑺樣品准備和前PCR區所使用的移液管在不使用時都應該小心保存。
5、在前PCR區建立PCR混合物。
⑴可以把即刻可用的「主混合物」溶液配好、分裝並保存在-20℃或4℃，在實驗室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。⑵如果你的實驗室使用多套引物，以致於配製包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。⑶作為一個規則，應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配製和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明裡面不含擴增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染，陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。⑸當做陽性對照時，有兩個理由決定了應該使用最少數量的核酸。⑹由於必須有對照反應，對照模板的特點應該予以考慮。
6、控制污染的方法。
已設計出很有力的酶學方法用來消除一種形式的污染—使用UNG，這一技術能有效地消除由PCR產物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除污染問題，但可以將污染降低幾個數量級。
7、後PCR區PCR完成以後，需要分析樣品並解釋數據，應該留出一個專門用於反應後處理樣品的地方。後PCR活動中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用於這一目的，決不能把實驗室這一區域的試劑或儀器用於任何前PCR活動

9. 分子病理實驗室建設如何設計劃分

第一節 病理實驗室規劃建設的目的
病理學在臨床醫學的重要性作為臨床學家和診斷學家William Osler對病理學在醫學中的地位作了重要評價：As is our pathology, so is our medicine（病理為醫之本）。這種評價充分反映了病理學作為臨床醫學的基礎，推動著臨床醫學的發展，同時也包含著臨床對病理的需求和期待。病理學是研究疾病狀態下致病因子與機體相互反應中患病機體的有關組織或器官的代謝、機能和形態結構的改變，其目的是認識和掌握疾病的本質和發生發展的規律，從而為防治疾病提供必要的理論基礎和實踐依據.缺乏病理學的研究，人類無從認識疾病，更無法預防和治療疾病。病理實驗室在醫院中的主要任務包括對穿刺標本、手術活檢及切除標本、屍體解剖完成診斷工作，其范圍幾乎涉及到所有臨床科室的大部分疾病的診斷。病理專業的水平直接影響醫院的診斷和治療水平。眾所周知，由於病理專業的工作特點，病理診斷通常被認為是最後診斷，甚至被稱為「金診斷」，對病人的進一步治療和提示預後有著極其重要的意義。
第二節 病理實驗室科學化建設的重要性
一、病理實驗室的科學化建設有利於病理實驗室工作者的身體健康 病理實驗被稱之為「醫之本」，但長期以來因為種種原因，病理實驗工作者的都在一個相當惡劣的工作環境中工作。病理實驗過程中的甲苯、二甲苯、福爾馬林、脫水試劑、染色試劑以及包埋石蠟等各種有毒、有刺激性氣味充實於整個實驗流程中。其中苯類有機揮發物如果長期吸入過量可能導致人體內白細胞數量的銳減，從而導致白血病。 要解決這些問題，就必須對病理實驗室進行科學的規劃和建設。如：將診斷辦公區與實驗區分成兩個區域，診斷辦公區宜靠南面，實驗區宜靠北面。為標本保存、取材、脫水、包埋、染色等可能產生有毒、有刺激性氣味的實驗過程，採用通風設備加以保護，降低實驗室有毒有害氣體的含量。同時病理實驗室是一個有序的流程，合理的安排不同的功能不僅有利於實驗室的管理，也有利於工作效率的提高。
二、病理實驗室的科學化建設有利於醫院的長遠發展規劃 「病理為醫之本」，病理學作為臨床醫學的基礎，推動著臨床醫學的發展。醫院的發展依賴於臨床醫學的發展，臨床醫學的發展又依賴於病理實驗室的發展，所以說病理實驗室的科學化建設有利於醫院的長遠發展規劃。病理實驗環境的提高，病理診斷水平也將得到提高，才能正確、快速的診斷疾病，提高醫院的知名度。 先說這么多吧！大家有興趣，再和大家研究研究。
病理實驗室規劃(第二章)
XX市人民醫院病理實驗室規劃總說明
第一節 XX市人民醫院病理科現狀 XX市人民醫院病理科實驗室目前的只有兩個房間，一個房間用來做診斷辦公室，一個房間做取材、脫水及製片等技術室。而且進入技術用房要經過診斷辦公用房，也就是說病理實驗中的第一大污染源每一次都是從診斷辦公區經過進入實驗區的。此外，XX市人民醫院病理科全部的實驗流程僅僅在一間小小的實驗室內進行，很多的實驗不可能在這個狹小的空間內完成，如：快速冰凍切片、免疫組化、細胞學及TCT等快速及准確的病理實驗無法開展。
第二節 新病理實驗室設計總說明
一、實驗室設計的主要依據
1.為臨床醫學的診斷提供更科學的依據，為臨床醫學的發展提供更明確的方向。 2.根據病理實驗室中、長遠規劃，合格的分配實驗室空間，為臨床醫學更好的服務。
二、實驗室設計的規模及范圍
1.全面貫徹在經濟可能條件下注意科學實用的設計方針，達到實驗室高質量、高實用，並為實驗室工作人員科學、舒適的工作環境。
2. 滿足各項設計規范前提下，考慮實驗室科學性、實用性及美觀性。
3. 綜合考慮周圍環境及地形條件。
4. 充分考慮實驗室的生物安全設計，保證實驗室的工作環境不受外界環境的影響，也保證實驗室的污染(水污染、空氣污染)不會影響外部的環境。
三、工程設計的規模及概況
本工程病理實驗室位於XX市人民醫院新建門診大樓六樓。門診大樓一共九層，方位坐北朝南，病理實驗室總建設面積500多個平方。大樓採用框架結構、現澆樓板設計，建築開模7200mm。大樓目前建設到了第七層，將於近期完工。實驗室開展病理的常規診斷，免疫組化學、細胞學、快速病理診斷等，為臨床醫學的診斷和發展提供更科學的依據。
第三節 實驗室總平面設計
一、實驗室平面設計總說明病理實驗室平面布局設計見總平面圖。實驗區設立標本接收室、標本存儲室、取材脫水室、包埋切片及冰凍切片室、染色製片室、細胞學及TCT室、免疫化及特染室各一間。辦公區設立綜合閱片及辦公室、文檔資料室、玻璃檔案室、主任辦公室各一間。實驗室輔助用房設立男女更衣衛生間各一間、葯品倉庫室一間。
二、實驗室平面設計理念
確定合理實驗流程：與實驗室操作人員溝通，確定合理的實驗流程圖，要求該流程對病理診斷、分析最有利，對實驗室人員安全操作起保護作用。
2. 確定實驗室設備及實驗台、櫃、通風櫃及通風設備：與實驗室操作人員溝通，確定各個不同的功能室儀器設備的擺放和定製實驗室專用傢具。
3. 確定實驗區與辦公區以及輔助功能室：確定重污染實驗區與輕污染實驗區，可以確定各功能區域合理污染程度。同時在重污染區我們要設計合理的通風設備加以保護，以防止污染在不同的功能區域間滲透擴散，保障實驗操作人員的安全。具體要注意以下幾點：
A. 實驗室的設計要參照《綜合醫院建築設計規范》；
B. 實驗室安全設計要遵循《ISO15190：2003（E）2003.10.15第1版醫學實驗室——安全要求》
C. 確定不同功能區域的污染嚴重程度，合理規劃流程；
D. 確定人員流動的線路、及人員活動的密集程度，嚴格執行人員流動最小化，盡量採用大空間設計，以減少人員在公共區域的活動,並要求標本傳遞線路最短；
E. 確定潛在污染外溢的防護措施；
F. 確定實驗室「三廢」排放需滿足標准；
G. 確定實驗室通信、消防設施齊全和實驗室自我保護功能、必要的檢測、顯示、報警功能；
病理實驗室規劃(第三章)
病理實驗室整體規劃設計說明
第一節 病理科實驗室建築設計的主要依據：
《綜合醫院建築設計規范》 (JGJ49-88)
《科學實驗室建築設計規范》（JGJ91-93）
《實驗室生物安全通用要求》 (GB 19489—2004)
《醫學實驗室質量和能力特殊要求》 (ISO-15189)
《第1版醫學實驗室——安全要求》(ISO-15190)
實驗室工作人員對實驗室設計的要求及設想
第二節 病理科實驗功能區域主要組成： 針對病理實驗室主要用途、基本性能指標等特點，確定合理功能區域劃分，同時實驗室功能區域劃分應滿足有足夠空間放置實驗台、通風櫃普通工作台及其基本的設備如試劑冷藏櫃、冰凍切片機、離心機等儀器的要求。對於XX市人民醫院病理實驗室我們建議試驗區有功能區域如下：標本接收室、標本儲存室、取材脫水室、包埋切片及冰凍切片室、染色製片室、細胞學及TCT室、免疫及特染室。標本接收室、標本儲存室、取材脫水室為重度污染區，包埋切片及冰凍切片室、染色製片室、細胞學及TCT室、免疫及特染室為輕度污染區；綜合閱片及辦公室、文檔資料室、玻蠟檔案室、主任辦公室為潔凈辦公區；輔助用房可設置在實驗區的一端。
第三節 病理科實驗室裝修建議方案:
一、隔斷方案：病理科整體隔斷建議採用上鋼化白玻、下部實牆，下部實牆高度與外牆窗檯等高，隔斷牆體與靠外牆的實驗室內部牆面表面以優質瓷磚被覆，以防止牆面積塵。上部採用10mm以上優質鋼化白玻，轉角和開門處做立柱。
二、地面方案：病理科實驗區地面建議採用2mm以上PVC卷材，PVC卷材具有無縫隙，不易積塵，高耐磨、抗沖擊性強，抗菌、易清潔、無噪音等特性。是實驗室地面的首選材料。病理科辦公室及輔助用房地面建議採用不小於600×600mm優質拋光磚。
三、天花方案：病理實驗室天花建議採用輕質龍骨嵌入式或浮擱式鋁制扣板天花。
四、門鎖方案：病理實驗室建議採用方便耐用的球形門鎖。
五、防蚊、防蟲、防鼠方案：為了對標本和實驗區進行保護，建議病理實驗室整個區域做防蚊、防蟲、防鼠處理，即在外牆窗戶安裝防蚊、防蟲、防鼠紗窗。
六、安全防盜方案：為了保護病理實驗室儀器設備、電腦以及病理檔案、標本的安全，建議在病理實驗與其它區域的連接處安裝防盜門。

10. PCR實驗室建設中的關鍵控制點

PCR Laboratory Critical Control Point)：
1 實驗室空調通風系統設計及壓力控制

PCR實驗室並沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區域間交叉污染的可能性，宜採用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。

1.1 試劑貯存和准備區

該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用於標本製作的材料應直接運送至該區，不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內，並在本區內制備成所需的貯存試劑。

對與氣流壓力的控制，本區並沒有嚴格的要求。

1.2 標本制備區

該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。

本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。另外，由於在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染，所以應避免在本區內不必要的走動。

1.3 擴增反應混合物配製和擴增區

該區域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中，通常在第一輪擴增後必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區內進行。

本區的壓力梯度要求為：相對於鄰近區域為負壓，以避免氣溶膠從本區漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈台內進行。

1.4 擴增產物分析區

該區域主要進行的操作為擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測，此區域可不設。

本區是最主要的擴增產物污染來源，因此對本區的壓力梯度的要求為：相對於鄰近區域為負壓，以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。

2 污染的預防與控制

PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中，常見的有以下幾種污染類型：擴增產物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標本間的污染。由於一旦發生污染，實驗就必須停止，直到找到污染源為止，而且實驗結果必須作廢，需重新進行實驗。所以發生污染後再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免污染，首先應是預防，而不是排除。

2.1 工作區域的嚴格劃分

（1）各個實驗區域設置合理；
（2）各個實驗區域要有明顯的標記（如醒目的門牌或不同的地面顏色等），以避免各個不同實驗區域設備物品、試劑等發生混淆。

2.2 合理的系統設置

（1）合理的空調通風系統設置，盡量採用全送全排的空調系統；
（2）嚴格的氣流壓力控制，保證不同的實驗區內不同的壓力要求。

2.3 規范的操作

（1）臨床基因擴增檢驗實驗室的技術人員必須進行上崗培訓，經培訓合格後才能從事臨床基因擴增檢驗的工作；
（2）在實驗操作過程中，操作者必須戴手套，並經常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個有效地防止污染的措施；
（3）清潔工作及時、正確。實驗工作結束後，必須立即對本區進行清潔。除常規的消毒液體對表面進行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對一些實驗設備還應進行高壓消毒處理。

2.4 嚴格的管理

（1）嚴格控制進出實驗室的人員。與實驗無關的人員不得隨意進出實驗室，有條件的情況下要設置獨立的通道和進出整個實驗區的門；
（2）在各個實驗區域使用帶有明顯區別標志的工作服（如不同顏色），當工作人員離開時不得將本區的工作服帶至其它區域；
（3）盡量減少在實驗區內不必要的走動以減少交叉污染的可能性。
（4）擴增產物分析區是最主要的擴增產物污染來源，廢液不能在實驗室中傾倒，必須經消毒液浸泡消毒後在遠離實驗室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應經消毒液浸泡消毒後統一處理，如焚燒等；
（5）擴增產物分析區可能會用到某些可致基因突變和有毒物質，應特別注意實驗人員的安全防護。

2.5 完備的實驗室配套設施

完備的實驗室配套設施是保證實驗工作的必要條件，應根據各個實驗室實驗內容的不同配備相應的設備和儀器，如超凈工作台、離心機、加樣器等。