㈠ 微生物知识
美国药典（USP）中规定：“将微生物接种至一新鲜培养基上/内，每萌发一次即称为一代，因此，当原始菌种复溶并转至一培养基内生长，即认为已传代一次，” 并规定“菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代”。我国的GMP认证中也如此要求，并且中国药典2005年版药典也已做出“菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代”这个明确的规定。
实验室菌种的传代保藏过程
1. 按菌种说明书要求复溶菌粉，转种于适当的增菌培养基内（G1），复壮后转接至平板上，并于适当温度下培养适当时间，分离出单个纯种菌落，此为第2代（G2）。
2. 菌种鉴定完成后，挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管，同时挑取纯菌落转接斜面菌种作为工作用菌种。此时，保藏菌种为第2代，但工作用菌种则为第三代。
3. 将第2代菌种管冷冻保存，将工作用菌种于适当温度下培养适当时间后可用于试验。
4. 取一支冷冻保存的G2代菌种转种于平板和斜面培养基上，平板上的菌种制成冷冻保藏管第三代（G3），斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用菌种（W3）。
5. 将第三代菌种（G3）冷冻或低温保存，将生长、转种后的G2菌种经灭菌处理后丢弃。
6. 当工作用菌种代数小于5时，可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种，如W3可直接转接为W4。
7. 按上述程序操作，直至G4转为W5为止，需重新开启安瓿，再重复上述操作程序、保藏和使用菌种。
以上方法中，菌种被分为两类。传代用菌种和工作用菌种，传代用菌种用于甘油冷冻管法保藏，工作用菌种用斜面低温保藏法保藏。
实验证明，甘油冷冻管的有效期至少为2年，但其主要适用于细菌（需氧）、酵母菌的传代、保藏、对厌氧菌、真菌和芽孢类细菌则需应用其它方法。
㈡ 微生物的培养方法有哪些
微生物培养法是在人为条件下繁殖微生物的方法。根据微生物的种类以及对养料、温度、氧气、水分、酸碱度等环境条件的要求不同，并联系生产和实验上的具体要求，可有不同的培养方法。可分好气培养法和厌气培养法两类。中海生物技术的培养基一是好气微生物培养法，常用：
①摇床培养法，即将微生物接种于盛有液体培养基的三角瓶后，放在恒温培养室中的摇床上作有节奏的振荡，使空气不断进入培养液中，促其良好生长;
②浅盘培养法，又称表面培养法，在盘内放一浅层培养基，使微生物能够充分接触空气，而有利于生长繁殖，但此法所需空间大，并且容易污染杂菌;
③深层培养法，适用于好气微生物的大规模发酵培养，在大容积的液体培养基中，通入无菌空气，并不断搅拌，可使微生物充分接触空气，迅速繁殖并积累代谢产物。二是厌气微生物培养法，实验室常用化学还原剂或抽气机吸除培养基中的分子氧，也有用静止状态的深层培养法。在生产中常用密封式发酵罐或不通风的固体发酵法。
㈢ 微生物的培养方法
1．平板划线分离培养法
对混有多种细菌，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法：
①分区划线分离法：此法常用于含菌量较多的细菌的分离。先用接种环挑取标本涂布于琼脂平板1区（占培养基总面积的¼）并作数条划线，再于2、3、4区依次划线。每划完一个区域，均将接种环烧灼灭菌1次，冷后再划下一区域，每一区域的划线均与上一区域的划线交接1~3次。一个成功分区划线的平板，培养后分别观察1区形成菌苔，2区菌落连成线，3区和4区可分离到单个菌落。
②连续划线分离法：此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹，然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种，直至划满琼脂平板表面。
2.琼脂斜面接种法
主要用于菌落的移种，以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环（针）挑取单个菌落或培养物，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后再从底部沿直线向上曲折连续划线，直至斜面近顶端处止。生化鉴定培养基斜面接种，用接种针挑取待鉴定细菌的菌落，从斜面中央垂直刺入底部，抽出后在斜面上由下至上曲折划线接种。
3．穿刺接种法
此法多用于半固体培养基或双糖铁、明胶等具有高层的培养基接种，半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时用接种针挑取菌落，由培养基中央垂直刺入至距管底0.4cm处，再沿穿刺线退出接种针。双糖铁等有高层及斜面之分的培养基，穿刺高层部分，退出接种针后直接划线接种斜面部分。
4．液体培养基接种法
用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落，倾斜液体培养管，在液面与管壁交界处研磨接种物（以试管直立后液体淹没接种物为准）。此接种法应避免接种环与液体过多接触，更不应在液体中混匀、搅拌，以免形成气溶胶，造成实验室污染。
5．倾注平板法
本法主要用于饮水、饮料、牛乳等标本中的细菌计数。取纯培养物的稀释或原标本1ml至无菌培养皿内，再将已融化并冷却至45~50℃左右的琼脂培养基15~20ml倾注入该无菌培养皿内，混匀，待凝固后置37℃培养，长出菌落后进行菌落计数，以求出每毫升标本中所含菌数。先数6个方格（每格为1cm2）中菌落数，求出每格的平均菌落数，并算出平皿直径，然后按下列公式计数，求出每毫升标本中的细菌数。
全平板菌落数=每方格的平均菌落数×лr2
每ml标本中的细菌数=全平板菌落数×稀释倍数
6．涂布接种法
本法多用于纸片扩散法药敏试验的细菌接种。将一定量或适量的菌液加到琼脂培养基表面，然后用灭菌的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布，使被接种液均匀分布于琼脂表面，然后贴上药敏纸片，或直接培养，本法经培养后细菌形成菌苔。
㈣ 关于微生物的知识
很多的，但推荐华中农大微生物学精品课程网站，坚持便可。老师备课也来参考的，少有的好网站。 http://nhjy.hzau.e.cn/kech/wswx/index2.htm 祝你成功！ 还有很多 见 http://wenku..com/view/396bf4f9aef8941ea76e0568.html
㈤ 微生物相关的培训和研讨会有哪些
以制药微生物学理论为基础，结合国际、国内的药典、法规和行业协会指南全面讨论无菌药品的微生物污染控制原理、原则和策略。本培训将分为以下五大模块。
1、制药微生物学基础
与制药相关的微生物基本特性，包括分类、生理与形态结构、胁迫条件对微生物生长和存活的影响、生长和死亡特性、定性与定量检测原理与特性等。
2、湿热灭菌工艺的基本原理及验证
灭菌工艺的核心概念(D值、z值和F值等)、湿热灭菌工艺的基本原理及其应用(饱和蒸汽、非饱和蒸汽、过热灭菌和非过热灭菌等)、湿热灭菌工艺程序的验证策略及实例介绍、生物指示剂在灭菌工艺验证中的实际应用、最终湿热灭菌产品的微生物控制和无菌参数放行等。
3、无菌工艺及验证
无菌工艺环境监控及数据评价、无菌工艺验证原理及策略、无菌工艺环境偏差的调查与处理等
4、生物制品生产的微生物污染控制与评价
生物原料药生产的上游(细胞培养阶段)和下游(原料药的纯化、去病毒和处方定性)各主要工艺步骤的微生物污染控制特点、原则及方法等
5、微生物污染共性问题探讨
微生物实验室管理、生物膜的特性与控制、去热原工艺验证与评价、超标结果的调查和评价策略等
㈥ 微生物学专业知识 微生物培养
碳源其实就是能够被生物直接利用的含碳化合物，“速效”和“迟效”只是利用速度问题。例如葡萄糖和蔗糖等被微生物利用的速度较快，它们是速效碳源，而乳糖、 淀粉等被利用的速度相对较为缓慢， 它们是迟效碳源。
㈦ 微生物的小知识
微生物以惊人的速度“生儿育女”。例如大肠杆菌在合适的生长条件下，12.5-20分钟便可繁殖一代，每小时可分裂3次，由1个变成8个。每昼夜可繁殖72代，由1个细菌变成4722366500万亿个（重约4722吨）；经48小时后，则可产生2.2×1043个后代，如此多的细菌的重量约等于4000个地球之重。当然，由于种种条件的限制，这种疯狂的繁殖是不可能实现的。细菌数量的翻番只能维持几个小时，不可能无限制地繁殖。因而在培养液中繁殖细菌，它们的数量一般仅能达到每毫升1－10亿个，最多达到100亿。尽管如此，它的繁殖速度仍比高等生物高出千万倍。
此外还有青霉素的发现，
巴斯德的曲颈瓶实验否定了微生物的“自然发生说”
微生物的绝对可靠性
微生物无处不在
㈧ 微生物知识专业培训
微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活关系密切。涵盖了有益有害的众多种类，广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。
现代定义
微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物，个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微生物。微生物包括细菌、病毒、真菌、和少数藻类等。(但有些微生物是肉眼可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。)病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的“非细胞生物”，但是它的生存必须依赖于活细胞。根据存在的不同环境分为原核微生物、空间微生物、真菌微生物、酵母微生物、海洋微生物等。
微生物 - 发现历史
形态学时期
微生物的形态观察是从安东·列文虎克发明的显微镜开始的，他利用能放大50～300倍的显微镜，清楚地看见了细菌和原生动物，他的发现和描述首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物世界。在微生物学的发展史上具有划时代的意义。
生理学时期
继列文虎克发现微生物世界以后的200年间，微生物学的研究基本上停留在形态描述和分门别类阶段。直到19世纪中期，以法国的巴斯德和德国的柯赫为代表的科学家才将微生物的研究从形态描述推进到生理学研究阶段，揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因，并建立了分离、培养、接种和灭菌等一系列独特的微生物技术。从而奠定了微生物学的基础，同时开辟了医学和工业微生物等分支学科。巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人。
巴斯德和柯赫的杰出工作，使微生物学作为一门独立的学科开始形成，并出现以他们为代表而建立的各分支学科，例如细菌学(巴斯德、柯赫等)、消毒外科技术(J. Lister)，免疫学(巴斯德、Metchnikoff、Behring、Ehrlich等)、土壤微生物学(Beijernck Winogradsky 等)、病毒学(Ivanowsky、Beijerinck等)、植物病理学和真菌学(Bary、Berkeley等)、酿造学(Hensen、Jorgensen 等)以及化学治疗法(Ehrlish 等)。微生物学的研究内容日趋丰富，使微生物学发展更加迅速。
现代微生物学
19世纪末和20世纪初，微生物学被牢固地建立起来。其后，它的主要发展有两个方面：一是研究传染病和免疫学，研究疾病的防治和化学治疗剂的功效;另一方面是和遗传学的结合。
原核生物
原核微生物(prokaryotic microbe)：
指核质和细胞质之间不存在明显核膜，其染色体由单一核酸组成的一类微生物。
原核微生物的核很原始，发育不全，只是DNA链高度折叠形成的一个核区，没有核膜，核质裸露，与细胞质没有明显界线，叫拟核或似核。原核微生物没有细胞器，只有由细胞质膜内陷形成的不规则的泡沫结构体系，如间体和光合作用层片及其他内折。也不进行有丝分裂。原核微生物形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。
原核微生物包括古菌(即古细菌)、真细菌、放线菌、蓝细菌、粘细菌、立克次氏体、支原体、衣原体和螺旋体。
微生物群
种类
原核：细菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次氏体、衣原体。
真核：真菌
球菌、藻类(部分)、原生动物(部分)。
非细胞类：病毒和亚病毒。
一般地，在中国大陆地区的教科书中，均将微生物划分为以下8大类：
细菌、病毒、真菌、放线菌(广义上属于细菌的一种)、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体。
细菌
(1)定义：一类细胞细短，结构简单，胞壁坚韧，多以二分裂方式繁殖和水生性强的原核生物。
(2)分布:温暖，潮湿和富含有机质的地方。
(3)结构：主要是单细胞的原核生物，有球形，杆形，螺旋形。
基本结构：细胞膜细胞壁细胞质核质。
特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。
(4)繁殖: 主要以二分裂方式进行繁殖的。
(5)菌落： 单个细菌用肉眼是看不见的，当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，便会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群落。
菌落是菌种鉴定重要的依据。不同种类的细菌菌落的大小，形状光泽度颜色硬度透明度都不同。
放线菌
(1)定义:一类主要成菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生
㈨ 微生物小知识
20
世纪以来，生物化学和生物物理学向微生物学渗透，再加上电子显微镜的发明和同
位素示踪原子的应用，推动了微生物学向生物化学阶段的发展。
1897
年德国学者毕希纳发
现酵母菌的无细胞提取液能与酵母一样具有发酵糖液产生乙醇的作用，
从而认识了酵母菌酒
精发酵的酶促过程，将微生物生命活动与酶化学结合起来。
诺伊贝格等人对酵母菌生理的研究和对酒精发酵中间产物的分析，
克勒伊沃对微生物代
谢的研究以及他所开拓的比较生物化学的研究方向，
其他许多人以大肠杆菌为材料所进行的
一系列基本生理和代谢途径的研究，都阐明了生物体的代谢规律和控制其代谢的基本原理，
并且在控制微生物代谢的基础上扩大利用微生物，发展酶学，推动了生物化学的发展。从
20
世纪
30
年代起，人们利用微生物进行乙醇、丙酮、丁醇、甘油、各种有机酸、氨基酸、
蛋白质、油脂等的工业化生产。
1929
年，弗莱明发现青霉菌能抑制葡萄球菌的生长，揭示了微生物间的拮抗关系，并
发现了青霉素。
1949
年，瓦克斯曼在他多年研究土壤微生物所积累资料的基础上，发现了
链霉素。
此后陆续发现的新抗生素越来越多。
这些抗生素除医用外，
也应用于防治动植物的
病害和食品保藏。
1941
年，比德尔和塔特姆用
X
射线和紫外线照射链孢霉，使其产生变异，获得营养缺
陷型。
他们对营养缺陷型的研究不仅可以进一步了解基因的作用和本质，
而且为分子遗传学
打下了基础。
1944
年，埃弗里第一次证实了引起肺炎球菌形成荚膜遗传性状转化的物质是
脱氧核糖核酸
(DNA)
。
1953
年，沃森和克里克提出了
DNA
分子的双螺旋结构模型和核酸半
保留复制学说。
富兰克尔
-
康拉特等通过烟草花叶病毒重组试验，证明核糖核酸
(RNA)
是遗传信息的载
体，为奠定分子生物学基础起了重要作用。其后，又相继发现转运核糖核酸
(tRNA)
的作用机
制、
基因三联密码的论说、
病毒的细微结构和感染增殖过程、
生物固氮机制等微生物学中的
重要理论，展示了微生物学广阔的应用前景。
1957
年，科恩伯格等成功地进行了
DNA
的体外组合和操纵。近年来，原核微生物基因
重组的研究不断获得进展，
胰岛素已用基因转移的大肠杆菌发酵生产，
干扰素也已开始用细
菌生产。现代微生物学的研究将继续向分子水平深入，向生产的深度和广度发展。
在微生物学的发展过程中，
按照研究内容和目的的不同，
相继建立了许多分支学科：
研
究微生物基本性状的有关基础理论的有微生物形态学、
微生物分类学、
微生物生理学、
微生
物遗传学和微生物生态学；
研究微生物各个类群的有细菌学、
真菌学、
藻类学、
原生动物学、
病毒学等；
研究在实践中应用微生物的有医学微生物学、
工业微生物学、
农业微生物学、
食
品微生物学、乳品微生物学、石油微生物学、土壤微生物学、水的微生物学饲料微生物学、
环境微生物学、免疫学等。
由于微生物学各分支学科的相互配合、
互相促进，
以及与生物化学、
生物物理学、
分子
生物学等学科的相互渗透，使其在基础理论研究和实际应用两方面都有了迅速的发展