A. 如何学会高效液相色谱
只要有仪器,用两次就会了,没什么难得。
这种东西都保密,真是服了。
B. 气相色谱法的实验总结怎么写
气相色谱法的实验总结报告主要分为:
一、描述你的实验目的(如:)
1、了解气相色谱仪的各部件的功能;
2、加深理解气相色谱的原理和应用;
3、掌握气相色谱分析的一般实验方法;
4、学会使用FID气相色谱对未知物进行分析。
二、实验的原理:
1、气相色谱法基本原理(要列出自己实验的依据和实验数据);
2、气相色谱法定性和定量分析原理(分析和结果)。
C. 高效液相色谱法心得体会论文
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9??107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。
特点
1.高压:液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa。
2. 高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于 1h 。
3. 高效:近来研究出许多新型固定相,使分离效率大大提高。
4.高灵敏度:高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器,进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外,用样量小,一般几个微升。
5.适应范围宽:气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于 400 以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的 75% ~ 80% )原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。 据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20%,而能用液相色谱分析的约占70~80%。
高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且须在色谱仪中进行。
高效液相色谱法的主要类型及其分离原理
根据分离机制的不同,高效液相色谱法可分为下述几种主要类型:
1 .液 — 液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography)
流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于下式:
式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm--溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。
a. 正相液 — 液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。
b. 反相液 — 液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。
c. 液 — 液分配色谱法的缺点:尽管流动相与固定相的极性要求完全不同,但固定液在流动相中仍有微量溶解;流动相通过色谱柱时的机械冲击力,会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相(见后),可克服上述缺点。现在应用很广泛(70~80%)。
2 .液 — 固色谱法
流动相为液体,固定相为吸附剂(如硅胶、氧化铝等)。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是:当试样进入色谱柱时,溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附(未进样时,所有的吸附剂活性中心吸附的是S),可表示如下:
Xm + nSa ====== Xa + nSm
式中:Xm--流动相中的溶质分子;Sa--固定相中的溶剂分子;Xa--固定相中的溶质分子;Sm--流动相中的溶剂分子。
当吸附竞争反应达平衡时:
K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]
式中:K为吸附平衡常数。[讨论:K越大,保留值越大。]
3 .离子交换色谱法(Ion-exchange Chromatography)
IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。
以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下:
X-(溶剂中) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) + Cl- (溶剂中)
当交换达平衡时:
KX=[-R4N+ X-][ Cl-]/[-R4N+Cl-][ X-]
分配系数为:
DX=[-R4N+ X-]/[X-]= KX [-R4N+Cl-]/[Cl-]
[讨论:DX与保留值的关系]
凡是在溶剂中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法来进行分离。
4 .离子对色谱法(Ion Pair Chromatography)
离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中,使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物,从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示:
X+水相 + Y-水相 === X+Y-有机相
式中:X+水相--流动相中待分离的有机离子(也可是阳离子);Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对(如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等);X+Y---形成的离子对化合物。
当达平衡时:
KXY = [X+Y-]有机相/[ X+]水相[Y-]水相
根据定义,分配系数为:
DX= [X+Y-]有机相/[ X+]水相= KXY [Y-]水相
[讨论:DX与保留值的关系]
离子对色谱法(特别是反相)发解决了以往难以分离的混合物的分离问题,诸如酸、碱和离子、非离子混合物,特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。
5 .离子色谱法(Ion Chromatography)
用离子交换树脂为固定相,电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器,为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰,设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。
以阴离子交换树脂(R-OH)作固定相,分离阴离子(如Br-)为例。当待测阴离子Br-随流动相(NaOH)进入色谱柱时,发生如下交换反应(洗脱反应为交换反应的逆过程):
抑制柱上发生的反应:
R-H+ + Na+OH- === R-Na+ + H2O
R-H+ + Na+Br- === R-Na+ + H+Br-
可见,通过抑制柱将洗脱液转变成了电导值很小的水,消除了本底电导的影响;试样阴离子Br-则被转化成了相应的酸H+Br-,可用电导法灵敏的检测。
离子色谱法是溶液中阴离子分析的最佳方法。也可用于阳离子分析。
6 .空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography)
空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值最大,在色谱图上最后出现。
气相色谱法(gas chromatography 简称GC)是色谱法的一种。色谱法中有两个相,一个相是流动相,另一个相是固定相。如果用液体作流动相,就叫液相色谱,用气体作流动相,就叫气相色谱。
气相色谱法由于所用的固定相不同,可以分为两种,用固体吸附剂作固定相的叫气固色谱,用涂有固定液的担体作固定相的叫气液色谱。
按色谱分离原理来分,气相色谱法亦可分为吸附色谱和分配色谱两类,在气固色谱中,固定相为吸附剂,气固色谱属于吸附色谱,气液色谱属于分配色谱。
按色谱操作形式来分,气相色谱属于柱色谱,根据所使用的色谱柱粗细不同,可分为一般填充柱和毛细管柱两类。一般填充柱是将固定相装在一根玻璃或金属的管中,管内径为2~6mm。毛细管柱则又可分为空心毛细管柱和填充毛细管柱两种。空心毛细管柱是将固定液直接涂在内径只有0.1~0.5mm的玻璃或金属毛细管的内壁上,填充毛细管柱是近几年才发展起来的,它是将某些多孔性固体颗粒装入厚壁玻管中,然后加热拉制成毛细管,一般内径为0.25~0.5mm。
D. 色谱原理
在反相液相色谱中,固定相的极性小于流动相,洗脱顺序取决于溶质分子的疏水性,疏水性强的保留时间长!
色谱仪有很多种,你最好系统的了解学习下,这里有中国色谱网,上面的技术资料很齐全。
在这里说不可能说清楚的,而且很笼统,你还是在这个网站上学习技术资料吧。
如果你不是学化学分析专业的就很难搞得懂,所以我给几点建议:
一、色谱这东西不需要完全懂,色谱是一个分析及定量的办法,分析定量用的设备叫色谱仪。现在的色谱仪已经非常先进了,不需要人去做很多工作,所以你要做的是搞懂色谱仪的操作,色谱仪操作是很简单的,有说明书,工作站有工作站的说明书。抓紧看说明书,先搞懂色谱仪的操作。
二、如果你的色谱仪是新买的还没出保修期的话你们可以编个理由让厂家来人,来了让他们给你们再现场培训一下。现场培训总要比看资料明白的多。现在色谱市场竞争激烈,一般的厂家都能满足你的这种要求。
三、分析煤气中的苯重要的不是色谱仪,而是前处理,我们公司给客户做过这个项目。前处理非常麻烦。所以我劝你另外一点还要练好基本功,因为前处理的部分完全是靠人力来完成的,机器无法替代。
四、曲线图不是画的,是做出来,分析煤气中的苯应该是用面积外标法,你要配几种不同浓度的标样先做出图谱,然后再逐一校正,做好这个一是要化验的基本功好,保证配制的标样绝对准确;二是要熟悉你所使用的色谱工作站,这就要好好看说明书了。
基本上就是上面几点,都是我的很实用的经验。我们公司就是专业从事色谱仪销售和售后的单位,我本人也是色谱售后人员,我这里有全套的色谱培训资料电子版,逐一粘贴到这里也不现实。你想要的话就给我发邮件,我的邮箱是[email protected],我可以发给你。
E. 谁能提供一份关于液相色谱培训的小结
本次培训主要讲解了以下六个方面的内容:一、高效液相色谱法原理与方法发展二、高效液相色谱仪的原理、结构、使用和维护三、样品制备四、色谱柱的原理、选择及维护五、高效液相色谱数据处理及定性与定量分析六、高效液相色谱仪在各领域的应用由于高效液相色谱适于分析沸点高、相对分子量大,受热易分解的不稳定的有机化合物、生物活性物质以及多种天然产物,而这些化合物约占所有有机化合物的80%,因此,高效液相色谱仪具有广泛的使用范围,对于有机监测工作也就非常重要。而高效液相色谱仪的维护又决定了工作效率,因此为了能更好的更快速的完成监测工作,必须要懂得维护仪器,当然也必要的学习仪器的一些基本维修技术。对于经常遇到的堵塞问题是由于磷酸盐缓冲液在管路中沉积导致,解决办法就是每次做完实验先经纯水再经甲醇冲洗。色谱柱是高效液相色谱仪的核心部分,它的好坏直接影响到样品分离度的好坏,为了延长HPLC液相泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须注意以下几方面的事项:1、防止任何固体微粒进入HPLC液相泵体,因为尘埃或其它任何杂质都会磨损HPLC液相柱塞、HPLC密封环、HPLC液相缸体和HPLC液相单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是过滤,可采用Millipore 滤膜(0.2um 或 05um) 等滤器。2、流动相不应含有任何腐蚀性物质,含有缓冲液的流动相不应保留在泵内,尤其是HPLC停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含有缓冲液的流动相留在HPLC液相泵内,由于蒸发或泄漏,甚至只是由于溶液的静止,就可能析出盐的微小晶体,这些晶体将和上述固体微粒一样损坏HPLC密封环和HPLC柱塞等。因此,必须HPLC泵入纯水充分清洗后,再换成适合于HPLC色谱柱保存和有利于HPLC泵维护的溶剂(对于反相键合固定相,可以是甲醇或甲醇和水)。
3、HPLC泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相用完,否则HPLC空泵运转也磨损HPLC柱塞、HPLC密封环或HPLC缸体最终产生漏液。4、HPLC输液泵的工作压力不要超过规定的最高压力,否则会使高压密封环变形,产生漏液。5、流动相应先脱气,以免在HPLC泵内产生气泡,影响流量的稳定性,如果有大量气泡HPLC泵就无法工作。而一些常见故障的原因和解决办法也是得掌握的:1、没有流动相流出,又无压力指示。原因可能是HPLC泵内有大量的气体,这时可打开泄压阀,使HPLC泵在较大的流量(5ml/min)下运转,将气泡排尽,也可用一个50ml的注射器在泵出口处帮助抽出气体。另一个原因可能是HPLC密封环磨损,需更换。2、HPLC压力的流量不稳。原因可能是气泡,需要排除,或者是单向阀内有异物,可以卸下HPLC单向阀,浸入丙酮内,进行超声清洗。有时有可能是砂滤棒内有气泡或被盐的微小晶体粒或滋生的微生物部分堵塞,这时卸下砂滤棒浸入流动相内,超声除气泡,或将砂滤棒(片)浸入稀酸(如4mol/L硝酸)内迅速除去微生物或将盐溶解,再立即清洗。3、HPLC压力过高的原因,是管路被堵塞,需要清除或清洗。压力降低的原因则可能是管路有泄漏。检查堵塞或泄漏时可逐段进行。在管路中存在气泡会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰,严重时会造成分析灵敏度下降;气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定,使基线起伏。因此流动相必须预先脱气,在注入样品前也应注意排出样品注射器中的空气。本次培训还指导了色谱柱的选择,只有选择合适的色谱柱才能取得很好的色谱峰,也就能很好的定性及定量分析。如果色谱柱经过一段时间的使用后有凹陷的情况,也可以自行填补,即打开柱头,以相同或者相似的填料将凹陷的部分填平。对严重污染的柱子可以掉头使用,但必须将连接检测器的一端断开,将污染物质冲走,若基线还是有杂峰,也可以进行挖补,往往可基本恢复。
F. 专业性比较强的色彩培训
色彩中心即将出售的色彩大师 COLOURMASTER,其功能中的颜色转换器可达到各种颜色编码之间的转换。另外色彩课程中的量化设计方法应用性也很强,可以咨询一下。
G. 现代仪器分析技术培训后,怎样写总结
本书是高职高专“十一五”规划教材之一。教材以选择常规分析项目为中心,围绕分析测试任务学习分析方法的原理、仪器结构、使用维护方法、定性定量测定方法,内容深度以“必需”、“够用”为原则。教材内容共分两部分,第一部分为基础理论,重点介绍了常用的电位分析法、光谱分析法及色谱分析法等。第二部分为实训技术,共设计15个适用性强、操作简便、实验效果好的实
验为实训项目,涉及食品、环境监测、生物等领域以及电位法、电导法、光谱法和色谱法等分析方法。实训项目与职业岗位群紧密挂钩,方法全部取之于最新国家标准,突出了职业技能特点。
本书可作为高职高专生物技术类、食品类及环境监测等专业的教材,也可供相关技术人员