『壹』 生物专业英语翻译
在这项工作中,我们更详细研究的定位
个别核筹措的诱导
半乳糖苷酶,公益少年团的推动者NPTII在压制和
引起国家和估计实际核
转移。与此同时,对这一核定位
序列进行了研究后抑制蛋白
乙酰( HDACs )与曲古菌素A ( TSA )的。
我们发现,两个核转移到
揭露TATA盒诱导。核
滑动和定位被证明是导
组hyperacetylation 。
实验
酵母和细菌菌株,转化和
生长条件。我们利用大肠杆菌菌株
JM109 (盒)和酿酒cereivisae
应变2805 (毡+ , pep4 : : His3 , prbL - δ ,可以- 1 , Gal2 , his3 ,市建局3-52 ) ,这是善意提供的对照普
(相箕Rhii ,成员,韩国) 。转化
大肠杆菌大肠杆菌JM109细胞哈巴狗Fneo1 ? ,哈巴狗Fneo
? ( 1 ? -2 ) ,和YepMMS做钙氯
骑[ 10 ] 。质粒的构建被称为previ -
ously [ 11 , 12 ] 。
酵母细胞转化与同一纤溶酶
中频的氯化锂的方法[ 13 ] 。转化细胞
选定的SD最小合成培养基( 0.67 %
氨基酸免费酵母氮基(培养基) , 2 %谷氨酸
葡萄糖, 0.5 %硫酸铵, 1.5 %琼脂(培养基) ) 。
选定的克隆接种在100-200毫升的
液体培养基YPD ( 1 % ,酵母膏,蛋白胨2 % ,
2 %葡萄糖)或YPGal (一个完整的中型2 %
半乳糖)和成长为16-18 h ,直至OD600 = 0.8 -
1.2 。此外,转化生长的
固体YPD培养基( 1.5 %琼脂)补充
300微克/毫升geneticin ( G418 ) 。
代spheroplasts和染色质
水解微球菌核酸。酵母细胞
9
( 1 × 10 ) ,收集离心,洗涤
与无菌水和缓冲液( 10毫米的Tris -盐酸,
pH值7.4 , 1海里山梨醇, 0.5毫米β -巯基乙醇) ,
和悬浮在1毫升相同的缓冲区。要获得
spheroplasts ,一个细胞悬液进行了补充
20毫克/毫升Lyticase (酵母溶解酶, 800
单位/毫克,六西格玛)和孵育30 ° E与轻微
搅拌15-20分钟。进一步采取的步骤一间酒吧,
687议定书[ 15 ] 。在Spheroplasts被停职
1毫升的一个缓冲的染色质水解微
球菌核酸酶( 1海里山梨醇,氯化钠50毫米, 10毫米
三盐酸, pH值为7.4 , 5毫米氯化镁, 1毫米的氯化钙, 1毫米
β -巯基乙醇, 0.5毫米精, 0.1 %
NP一40 ) 。暂停的原生质( 200 UL )的是
转入微量管,补充
与150-350单位/毫升微球菌核酸酶(铁
mentas ) ,并培养在37 ° E的5分钟。反应
被终止,增加0.5米的最后四乙酸
浓度25毫米和10 %的SDS最后协商
centration的0.5 % 。
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