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微生物方面的知識培訓

發布時間:2022-03-16 05:24:26

㈠ 微生物知識

美國葯典(USP)中規定:「將微生物接種至一新鮮培養基上/內,每萌發一次即稱為一代,因此,當原始菌種復溶並轉至一培養基內生長,即認為已傳代一次,」 並規定「菌種的傳代次數(自原始菌種凍乾粉起)不得超過5代」。我國的GMP認證中也如此要求,並且中國葯典2005年版葯典也已做出「菌種的傳代次數(自原始菌種凍乾粉起)不得超過5代」這個明確的規定。

實驗室菌種的傳代保藏過程
1. 按菌種說明書要求復溶菌粉,轉種於適當的增菌培養基內(G1),復壯後轉接至平板上,並於適當溫度下培養適當時間,分離出單個純種菌落,此為第2代(G2)。
2. 菌種鑒定完成後,挑取純菌落製成濃菌懸液用於制備甘油冷凍管,同時挑取純菌落轉接斜面菌種作為工作用菌種。此時,保藏菌種為第2代,但工作用菌種則為第三代。
3. 將第2代菌種管冷凍保存,將工作用菌種於適當溫度下培養適當時間後可用於試驗。
4. 取一支冷凍保存的G2代菌種轉種於平板和斜面培養基上,平板上的菌種製成冷凍保藏管第三代(G3),斜面培養基經適當溫度下培養適當時間後用作工作用菌種(W3)。
5. 將第三代菌種(G3)冷凍或低溫保存,將生長、轉種後的G2菌種經滅菌處理後丟棄。
6. 當工作用菌種代數小於5時,可直接用上一代工作用菌種轉接下一代工作用菌種,如W3可直接轉接為W4。
7. 按上述程序操作,直至G4轉為W5為止,需重新開啟安瓿,再重復上述操作程序、保藏和使用菌種。
以上方法中,菌種被分為兩類。傳代用菌種和工作用菌種,傳代用菌種用於甘油冷凍管法保藏,工作用菌種用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明,甘油冷凍管的有效期至少為2年,但其主要適用於細菌(需氧)、酵母菌的傳代、保藏、對厭氧菌、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。

㈡ 微生物的培養方法有哪些

微生物培養法是在人為條件下繁殖微生物的方法。根據微生物的種類以及對養料、溫度、氧氣、水分、酸鹼度等環境條件的要求不同,並聯系生產和實驗上的具體要求,可有不同的培養方法。可分好氣培養法和厭氣培養法兩類。中海生物技術的培養基一是好氣微生物培養法,常用:
①搖床培養法,即將微生物接種於盛有液體培養基的三角瓶後,放在恆溫培養室中的搖床上作有節奏的振盪,使空氣不斷進入培養液中,促其良好生長;
②淺盤培養法,又稱表面培養法,在盤內放一淺層培養基,使微生物能夠充分接觸空氣,而有利於生長繁殖,但此法所需空間大,並且容易污染雜菌;
③深層培養法,適用於好氣微生物的大規模發酵培養,在大容積的液體培養基中,通入無菌空氣,並不斷攪拌,可使微生物充分接觸空氣,迅速繁殖並積累代謝產物。二是厭氣微生物培養法,實驗室常用化學還原劑或抽氣機吸除培養基中的分子氧,也有用靜止狀態的深層培養法。在生產中常用密封式發酵罐或不通風的固體發酵法。

㈢ 微生物的培養方法

1.平板劃線分離培養法

對混有多種細菌,採用劃線分離和培養,使原來混雜在一起的細菌沿劃線在瓊脂平板表面分離,得到分散的單個菌落,以獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法:

①分區劃線分離法:此法常用於含菌量較多的細菌的分離。先用接種環挑取標本塗布於瓊脂平板1區(占培養基總面積的¼)並作數條劃線,再於2、3、4區依次劃線。每劃完一個區域,均將接種環燒灼滅菌1次,冷後再劃下一區域,每一區域的劃線均與上一區域的劃線交接1~3次。一個成功分區劃線的平板,培養後分別觀察1區形成菌苔,2區菌落連成線,3區和4區可分離到單個菌落。

②連續劃線分離法:此法常用於含菌量不多的標本或培養物中的細菌分離培養。方法是先將接種物在瓊脂平板上1/5處輕輕塗抹,然後再用接種環或拭子在平板表面曲線連續劃線接種,直至劃滿瓊脂平板表面。

2.瓊脂斜面接種法

主要用於菌落的移種,以獲得純種進行鑒定和保存菌種等。用接種環(針)挑取單個菌落或培養物,從培養基斜面底部向上劃一條直線,然後再從底部沿直線向上曲折連續劃線,直至斜面近頂端處止。生化鑒定培養基斜面接種,用接種針挑取待鑒定細菌的菌落,從斜面中央垂直刺入底部,抽出後在斜面上由下至上曲折劃線接種。

3.穿刺接種法

此法多用於半固體培養基或雙糖鐵、明膠等具有高層的培養基接種,半固體培養基的穿刺接種可用於觀察細菌的動力。接種時用接種針挑取菌落,由培養基中央垂直刺入至距管底0.4cm處,再沿穿刺線退出接種針。雙糖鐵等有高層及斜面之分的培養基,穿刺高層部分,退出接種針後直接劃線接種斜面部分。

4.液體培養基接種法

用於各種液體培養基如肉湯、蛋白腖水、糖發酵管等的接種。用接種環挑取單個菌落,傾斜液體培養管,在液面與管壁交界處研磨接種物(以試管直立後液體淹沒接種物為准)。此接種法應避免接種環與液體過多接觸,更不應在液體中混勻、攪拌,以免形成氣溶膠,造成實驗室污染。

5.傾注平板法

本法主要用於飲水、飲料、牛乳等標本中的細菌計數。取純培養物的稀釋或原標本1ml至無菌培養皿內,再將已融化並冷卻至45~50℃左右的瓊脂培養基15~20ml傾注入該無菌培養皿內,混勻,待凝固後置37℃培養,長出菌落後進行菌落計數,以求出每毫升標本中所含菌數。先數6個方格(每格為1cm2)中菌落數,求出每格的平均菌落數,並算出平皿直徑,然後按下列公式計數,求出每毫升標本中的細菌數。

全平板菌落數=每方格的平均菌落數×лr2

每ml標本中的細菌數=全平板菌落數×稀釋倍數

6.塗布接種法

本法多用於紙片擴散法葯敏試驗的細菌接種。將一定量或適量的菌液加到瓊脂培養基表面,然後用滅菌的L型玻璃棒或棉拭子於不同的角度反復塗布,使被接種液均勻分布於瓊脂表面,然後貼上葯敏紙片,或直接培養,本法經培養後細菌形成菌苔。

㈣ 關於微生物的知識

很多的,但推薦華中農大微生物學精品課程網站,堅持便可。老師備課也來參考的,少有的好網站。 http://nhjy.hzau.e.cn/kech/wswx/index2.htm 祝你成功! 還有很多 見 http://wenku..com/view/396bf4f9aef8941ea76e0568.html

㈤ 微生物相關的培訓和研討會有哪些

以制葯微生物學理論為基礎,結合國際、國內的葯典、法規和行業協會指南全面討論無菌葯品的微生物污染控制原理、原則和策略。本培訓將分為以下五大模塊。

1、制葯微生物學基礎
與制葯相關的微生物基本特性,包括分類、生理與形態結構、脅迫條件對微生物生長和存活的影響、生長和死亡特性、定性與定量檢測原理與特性等。

2、濕熱滅菌工藝的基本原理及驗證
滅菌工藝的核心概念(D值、z值和F值等)、濕熱滅菌工藝的基本原理及其應用(飽和蒸汽、非飽和蒸汽、過熱滅菌和非過熱滅菌等)、濕熱滅菌工藝程序的驗證策略及實例介紹、生物指示劑在滅菌工藝驗證中的實際應用、最終濕熱滅菌產品的微生物控制和無菌參數放行等。

3、無菌工藝及驗證
無菌工藝環境監控及數據評價、無菌工藝驗證原理及策略、無菌工藝環境偏差的調查與處理等

4、生物製品生產的微生物污染控制與評價
生物原料葯生產的上游(細胞培養階段)和下游(原料葯的純化、去病毒和處方定性)各主要工藝步驟的微生物污染控制特點、原則及方法等

5、微生物污染共性問題探討
微生物實驗室管理、生物膜的特性與控制、去熱原工藝驗證與評價、超標結果的調查和評價策略等

㈥ 微生物學專業知識 微生物培養

碳源其實就是能夠被生物直接利用的含碳化合物,「速效」和「遲效」只是利用速度問題。例如葡萄糖和蔗糖等被微生物利用的速度較快,它們是速效碳源,而乳糖、 澱粉等被利用的速度相對較為緩慢, 它們是遲效碳源。

㈦ 微生物的小知識

微生物以驚人的速度「生兒育女」。例如大腸桿菌在合適的生長條件下,12.5-20分鍾便可繁殖一代,每小時可分裂3次,由1個變成8個。每晝夜可繁殖72代,由1個細菌變成4722366500萬億個(重約4722噸);經48小時後,則可產生2.2×1043個後代,如此多的細菌的重量約等於4000個地球之重。當然,由於種種條件的限制,這種瘋狂的繁殖是不可能實現的。細菌數量的翻番只能維持幾個小時,不可能無限制地繁殖。因而在培養液中繁殖細菌,它們的數量一般僅能達到每毫升1-10億個,最多達到100億。盡管如此,它的繁殖速度仍比高等生物高出千萬倍。

此外還有青黴素的發現,
巴斯德的曲頸瓶實驗否定了微生物的「自然發生說」
微生物的絕對可靠性
微生物無處不在

㈧ 微生物知識專業培訓

微生物是包括細菌、病毒、真菌以及一些小型的原生動物、顯微藻類等在內的一大類生物群體,它個體微小,卻與人類生活關系密切。涵蓋了有益有害的眾多種類,廣泛涉及健康、食品、醫葯、工農業、環保等諸多領域。

現代定義

微生物是一切肉眼看不見或看不清的微小生物,個體微小,結構簡單,通常要用光學顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚的生物,統稱為微生物。微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。(但有些微生物是肉眼可以看見的,像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。)病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」,但是它的生存必須依賴於活細胞。根據存在的不同環境分為原核微生物、空間微生物、真菌微生物、酵母微生物、海洋微生物等。

微生物 - 發現歷史

形態學時期

微生物的形態觀察是從安東·列文虎克發明的顯微鏡開始的,他利用能放大50~300倍的顯微鏡,清楚地看見了細菌和原生動物,他的發現和描述首次揭示了一個嶄新的生物世界——微生物世界。在微生物學的發展史上具有劃時代的意義。

生理學時期

繼列文虎克發現微生物世界以後的200年間,微生物學的研究基本上停留在形態描述和分門別類階段。直到19世紀中期,以法國的巴斯德和德國的柯赫為代表的科學家才將微生物的研究從形態描述推進到生理學研究階段,揭露了微生物是造成腐敗發酵和人畜疾病的原因,並建立了分離、培養、接種和滅菌等一系列獨特的微生物技術。從而奠定了微生物學的基礎,同時開辟了醫學和工業微生物等分支學科。巴斯德和柯赫是微生物學的奠基人。

巴斯德和柯赫的傑出工作,使微生物學作為一門獨立的學科開始形成,並出現以他們為代表而建立的各分支學科,例如細菌學(巴斯德、柯赫等)、消毒外科技術(J. Lister),免疫學(巴斯德、Metchnikoff、Behring、Ehrlich等)、土壤微生物學(Beijernck Winogradsky 等)、病毒學(Ivanowsky、Beijerinck等)、植物病理學和真菌學(Bary、Berkeley等)、釀造學(Hensen、Jorgensen 等)以及化學治療法(Ehrlish 等)。微生物學的研究內容日趨豐富,使微生物學發展更加迅速。

現代微生物學

19世紀末和20世紀初,微生物學被牢固地建立起來。其後,它的主要發展有兩個方面:一是研究傳染病和免疫學,研究疾病的防治和化學治療劑的功效;另一方面是和遺傳學的結合。

原核生物

原核微生物(prokaryotic microbe):

指核質和細胞質之間不存在明顯核膜,其染色體由單一核酸組成的一類微生物。

原核微生物的核很原始,發育不全,只是DNA鏈高度折疊形成的一個核區,沒有核膜,核質裸露,與細胞質沒有明顯界線,叫擬核或似核。原核微生物沒有細胞器,只有由細胞質膜內陷形成的不規則的泡沫結構體系,如間體和光合作用層片及其他內折。也不進行有絲分裂。原核微生物形狀細短,結構簡單,多以二分裂方式進行繁殖的原核生物,是在自然界分布最廣、個體數量最多的有機體,是大自然物質循環的主要參與者。

原核微生物包括古菌(即古細菌)、真細菌、放線菌、藍細菌、粘細菌、立克次氏體、支原體、衣原體和螺旋體。

微生物群

種類

原核:細菌、放線菌、螺旋體、支原體、立克次氏體、衣原體。

真核:真菌

球菌、藻類(部分)、原生動物(部分)。

非細胞類:病毒和亞病毒。

一般地,在中國大陸地區的教科書中,均將微生物劃分為以下8大類:

細菌、病毒、真菌、放線菌(廣義上屬於細菌的一種)、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體。

細菌

(1)定義:一類細胞細短,結構簡單,胞壁堅韌,多以二分裂方式繁殖和水生性強的原核生物。

(2)分布:溫暖,潮濕和富含有機質的地方。

(3)結構:主要是單細胞的原核生物,有球形,桿形,螺旋形。

基本結構:細胞膜細胞壁細胞質核質。

特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞。

(4)繁殖: 主要以二分裂方式進行繁殖的。

(5)菌落: 單個細菌用肉眼是看不見的,當單個或少數細菌在固體培養基上大量繁殖時,便會形成一個肉眼可見的,具有一定形態結構的子細胞群落。

菌落是菌種鑒定重要的依據。不同種類的細菌菌落的大小,形狀光澤度顏色硬度透明度都不同。

放線菌

(1)定義:一類主要成菌絲狀生長和以孢子繁殖的陸生

㈨ 微生物小知識

20
世紀以來,生物化學和生物物理學向微生物學滲透,再加上電子顯微鏡的發明和同
位素示蹤原子的應用,推動了微生物學向生物化學階段的發展。
1897
年德國學者畢希納發
現酵母菌的無細胞提取液能與酵母一樣具有發酵糖液產生乙醇的作用,
從而認識了酵母菌酒
精發酵的酶促過程,將微生物生命活動與酶化學結合起來。

諾伊貝格等人對酵母菌生理的研究和對酒精發酵中間產物的分析,
克勒伊沃對微生物代
謝的研究以及他所開拓的比較生物化學的研究方向,
其他許多人以大腸桿菌為材料所進行的
一系列基本生理和代謝途徑的研究,都闡明了生物體的代謝規律和控制其代謝的基本原理,
並且在控制微生物代謝的基礎上擴大利用微生物,發展酶學,推動了生物化學的發展。從
20
世紀
30
年代起,人們利用微生物進行乙醇、丙酮、丁醇、甘油、各種有機酸、氨基酸、
蛋白質、油脂等的工業化生產。

1929
年,弗萊明發現青黴菌能抑制葡萄球菌的生長,揭示了微生物間的拮抗關系,並
發現了青黴素。
1949
年,瓦克斯曼在他多年研究土壤微生物所積累資料的基礎上,發現了
鏈黴素。
此後陸續發現的新抗生素越來越多。
這些抗生素除醫用外,
也應用於防治動植物的
病害和食品保藏。

1941
年,比德爾和塔特姆用
X
射線和紫外線照射鏈孢霉,使其產生變異,獲得營養缺
陷型。
他們對營養缺陷型的研究不僅可以進一步了解基因的作用和本質,
而且為分子遺傳學
打下了基礎。
1944
年,埃弗里第一次證實了引起肺炎球菌形成莢膜遺傳性狀轉化的物質是
脫氧核糖核酸
(DNA)

1953
年,沃森和克里克提出了
DNA
分子的雙螺旋結構模型和核酸半
保留復制學說。

富蘭克爾
-
康拉特等通過煙草花葉病毒重組試驗,證明核糖核酸
(RNA)
是遺傳信息的載
體,為奠定分子生物學基礎起了重要作用。其後,又相繼發現轉運核糖核酸
(tRNA)
的作用機
制、
基因三聯密碼的論說、
病毒的細微結構和感染增殖過程、
生物固氮機制等微生物學中的
重要理論,展示了微生物學廣闊的應用前景。

1957
年,科恩伯格等成功地進行了
DNA
的體外組合和操縱。近年來,原核微生物基因
重組的研究不斷獲得進展,
胰島素已用基因轉移的大腸桿菌發酵生產,
干擾素也已開始用細
菌生產。現代微生物學的研究將繼續向分子水平深入,向生產的深度和廣度發展。

在微生物學的發展過程中,
按照研究內容和目的的不同,
相繼建立了許多分支學科:

究微生物基本性狀的有關基礎理論的有微生物形態學、
微生物分類學、
微生物生理學、
微生
物遺傳學和微生物生態學;
研究微生物各個類群的有細菌學、
真菌學、
藻類學、
原生動物學、
病毒學等;
研究在實踐中應用微生物的有醫學微生物學、
工業微生物學、
農業微生物學、

品微生物學、乳品微生物學、石油微生物學、土壤微生物學、水的微生物學飼料微生物學、
環境微生物學、免疫學等。

由於微生物學各分支學科的相互配合、
互相促進,
以及與生物化學、
生物物理學、
分子
生物學等學科的相互滲透,使其在基礎理論研究和實際應用兩方面都有了迅速的發展

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