衛生院o157h7培訓計劃

① 大腸桿菌O157:H7的簡介

腸出血性大腸桿菌（EHEC）是能引起人的出血性腹瀉和腸炎的一群大腸埃希氏菌。以O157:H7血清型為代表菌株。

② 什麼食品中有大腸桿菌O157:H7

「O157流行特點：
1.季節性：多發生於夏秋兩季6-9月為發病高峰。11月至次年2 月極少發病。
2.地區分布：多發生於發達國家，主要以散發性為主。
3.易感人群：兒童5-9歲、老人50-59歲明顯高於其它年齡組，最小3個月，最大85歲。
4.宿主：農場動物牛、羊、豬、雞、馬、鹿、鴿子、海鷗等均可能為大腸桿菌O157的攜帶者。
5.食源性E.coli O157:H7感染：牛肉、生奶、雞肉及其製品，蔬菜、水果及製品等均可引起污染，其中牛肉是最主要的傳播載體。」

但是目前正規食品，不會檢測出o157，你只能去買菌種保藏中心去購買。而且o157會致死，實驗室級別不夠，很容易導致o157擴散，做實驗時，要多加小心，消毒次數要頻繁。

③ 大腸桿菌O157:H7的致病性

(2)出血性結腸炎(HC)
(3)溶血性尿毒綜合症(HUS)
(4)血栓性血小板減少性紫癜(TTP)
E.coliO157:H7的感染劑量極低。伏期為3-10天，病程2-9天。通常是突然發生劇烈腹痛和水樣腹瀉，數天後出現出血性腹瀉，可發熱或不發熱。部分患者可發展為HUS、TTP等，嚴重者可導致死亡。

④ 下列哪一類的大腸埃希菌中含有O157:H7這一血清型

正確答案:D
解析：腸出血性大腸埃希菌(EHEC)中的O157:H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征(HUS)
。

⑤ 大腸桿菌O157:H7的E.coliO157:H7的檢驗

(一)國標法（常規法）
1、增菌培養
2、分離
3、鑒定
(二)金標試紙法
該方法是中華人民共和國衛生部頻布的「關於全國腸出血性大腸桿菌O157：H7感染性腹瀉應急處理預案」中的指定方法。
將樣品經過特殊的前增菌及增菌後，取120ul的增菌培養液放入試紙夾的樣品槽中，樣品由於毛細管作用移至反應區，反應區中含有特殊的抗體(E.coliO157:H7抗體)它與膠體金顆粒共軛偶聯。如果樣品中存在抗原，將同金標抗體結合形成抗原-抗體復合物，沿著硝酸纖維素膜向前移動至含有固定的抗E.coliO157:H7抗體區域(T區)，金標免疫的復合物與該區域的抗抗體發生特異性結合形成一條可見的線。其它的樣品繼續移動到膜的未端，最終進入廢物池被遺棄。
反應區也含有金標結合的一種專利抗原(顏色指示劑)，不管樣品中有沒有E.coliO157:H7抗原，它都被樣品洗脫。金標控制指示劑通過膜移動到陰性控制區與專利抗體結合形成一條可見的線。無論樣品中有沒有E.coliO157:H7抗原，控制線都將在控制區(C區)形成，來確保試驗正常進行。
增菌液滴入8-10分鍾後，觀察試紙C區和T區有無明顯的線。在C和T區都有可見的線，則結果為陽性。C區有線、T區無線，則結果為陰性。如C區無線，無論T區有沒有線，則實驗無效。
（三)ISO－GRID檢測系統
ISO－GRID檢測系統是一種基於疏水性網膜（HGMF）的過濾系統。該系統通過使用這種含有1600個小方格的濾膜，來對微生物進行檢測或計數。
首先，稀釋的樣品通過5um的不銹鋼預過濾器過濾，過濾掉可能引起微生物分析誤差的樣品殘渣顆粒。
然後，樣品通過流水的濾膜過濾。再將濾膜放在特異性的瓊脂培養板上培養，以檢測目標微生物。培養完成後，在膜上檢測目標微生物，並記錄陽性區域的數量。
濾膜不會染上瓊脂培養基的顏色，從而很容易地區別微生物，並進行鑒別和記數。此方法快速簡便，重復性好，而且，除大腸桿菌O157﹕H7外，還適用於沙門氏菌、酵母、黴菌、大腸菌群及大腸桿菌的檢測和計數。
(四)單克隆酶聯免疫分析篩選方法
該方法是對所有食品E.coliO157:H7的存在進行篩選，不是確證試驗，因為試驗中所用的單克隆抗體可能與少部分的非E.coliO157:H7有交叉反應。
陽性的檢疫結果應是客觀的，必須配有450nm濾光片的光度計來進行測試。只有當陰性和陽性對照均有可接受的光密度讀數時，陽性結果才是有效的。
原理E.coliO157:H7原的檢測是基於用特異性單克隆抗體進行的酶免疫分析(EIA)。用抗E.coliO157:H7抗原的單克隆抗體包被於聚苯乙烯微量小孔的內表面，將樣品和對照加入小孔中。樣品中如有E.coliO157:H7抗原存在，則將被吸附在孔上的特異性抗體吸收。沖洗後，加入結合劑與被抗體吸收的E.coliO157:H7抗原結合。再沖洗小孔，除去未結合的結合劑，然後再加入酶底物。當用終止液終止反應時，出現的藍色則轉變為黃色。樣品中是否有E.coliO157:H7抗原取決於顏色產生的光密度。
(五)自動酶聯熒光免疫檢測系統（VIDAS）篩選法
此E.coliO157:H7的抗原鑒別是基於在VIDAS儀器內進行的酶聯熒光免疫分析。像吸液管的裝置是固相容器（SPR），在分析中既作為固相也作為吸液器。SPR包被有高特異的單克隆抗體混合物。將一定量的增菌肉湯加入試劑條，肉湯中的混合物在特定時間內循環於SPR內外。如果有E.coliO157:H7抗原存在則與包被在SPR內的單克隆抗體結合，其他沒有結合上的化合物被沖洗掉。結合有鹼性磷酸酶的抗體在SPR內外循環與結合在SPR內壁上的E.coliO157:H7抗原結合，最後的沖洗步驟將沒有結合的接合劑沖洗掉。底物—4-甲基傘形磷酸酮被SPR壁上的酶轉換成熒光產物—4-甲基傘形酮。熒光強度由光學掃描器測定。實驗結果由計算機自動分析，產生基於熒光測試的試驗值與標准相比較後列印出每一個被測樣品的陽性或陰性結果報告。
(六)E.coliO157:H7快速酶觸反應顯色培養基法
快速酶觸反應是根據細菌在其生長繁殖過程中可合成和釋放某些特異性的酶，按酶的特性，選用相應的底物和指示劑，將它們配製在相關的培養基中。根據細菌反應後出現的明顯的顏色變化，確定待分離的可疑菌株，反應的測定結果有助於細菌的快速診斷。這種技術將傳統的細菌分離與生化反應有機的結合起來，並使得檢測結果直觀，成為今後微生物檢測發展的一個重要發展方向。
(七)DNA探針技術
DNA探針技術是最新發展起來的一項特異、靈敏、快速的檢測方法，但因有一定比例的假陽性反應，故所有陽性結果必須用標準的培養方法加以確證，
原理用特異性的DNA探針進行E.coliO157:H7核糖體RNA（rRNA）的檢測。待檢樣品經前增菌、選擇性增菌和後增菌後，溶解細菌。加入標記好的E.coliO157:H7異性的DNA探針用於液相雜交。如果待檢樣品中存有E.coliO157:H7的rRNA，熒光素標記的檢測探針和多聚脫氧腺嘌呤核苷酸(polydeoxyadenylicacid,polydA)末端捕獲探針將與目標rRNA序列進行雜交。然後把包被有多聚脫氧胸腺嘧啶核苷酸(polydeoxyadenylicacid,polydT)(固相)的測桿插入雜交溶液。PolydA和poldT之間進行鹼基配對，便於探針捕獲：目標雜種核酸分子結合在固體載體上，未接合的探針被沖洗掉。測桿被培養在辣根過氧化物酶-抗熒光素接合劑中。接合劑與存在於雜交檢測探針上的熒光素標記物結合，未結合的劑被沖掉。並將測桿培養於酶底物-色原溶液中，辣根過氧化物酶與酶底物反應，將色原轉變為藍色化合物。一旦遇酸反應便停止，色原的顏色變為黃色。在450nm處測量吸收值，吸收值大於臨界則表明在待檢的樣品中存有E.coliO157:H7。
(八)聚合酶鏈反應(PCR)技術
PCR技術原理為提高DNA探針的敏感性，可先將靶DNA序列擴增，增加DNA數量，使其達到足夠的檢測量，若反應以動力學為基礎，則能定量分析。1983年Millus和Cetus發明了最基本的擴增DNA或增加樣品中特殊核苷酸片段數量的方法-聚合酶鏈反應即PCR法。PCR法建立在三步重復發生反應的基礎上。①通過熱處理將雙股DNA變性裂解成單股DNA；②退火延伸引物至特異性寡核苷酸上；③酶促延伸引物與DNA配對合成模板，引物退火，變性DNA片段，引物雜交形成的模板可參與再次反應。溶液中核苷酸通過酶聚合成相互補對的DNA片段，並能重新裂解成單股DNA成為下次PCR復制的模板。因此每次循環特異性DNA將以雙倍量增加。典型擴增經過20～40次循環能引起100萬倍的擴增。在PCR反應中引人Taq聚合酶使反應得以半自動化和簡便反應程序。用擴增DNA進行的PCR反應具有無與倫比的優越性。

⑥ E.coli O157:H7 O和H都分別代表什麼後面的數字呢

O是菌體抗原,也就是細菌脂多糖的外層部分.
H是鞭毛抗原.
數字是代表這些抗原的種類編碼.就跟甲型H1N1病毒的數字一樣.

⑦ 為什麼CDC提出應將大腸埃希菌O157：H7列為常規檢測項目

EHEC的血清型＞50種,最具代表性的是O157:H7,在北美許多地區, O157:H7占腸道分離病原的第二位或第三位(多於志賀菌和耶爾森菌),是從血便中分離到的最常見的病原菌,分離率占血便的40%,6、7、8三個月O157:H7感染的發生率最高。 且O157是4歲以下兒童急性腎功能衰竭的主要病原菌,所以CDC提出應將大腸埃希菌O157:H7列為常規檢測項目。

⑧ 大腸埃希氏菌O157：H7/NM，其中NM是什麼意思

non motile
不運動的，一種表型的描述，和H7差不多，表示一種分型

⑨ 大腸桿菌O157 H7食物中毒的發生與人的飲食習慣有關嗎

大腸桿菌O157 H7是一種能產生毒素的大腸桿菌，是重要的導致食物中毒的病菌，通過各類熟肉製品、冷葷、牛肉、生牛奶、乳酪及蔬菜、水果、飲料等傳染給人，能引起出血性腹瀉及溶血性尿毒綜合征，嚴重的甚至死亡。本菌主要宿主是牛，豬、禽、羔羊的肉製品也能分離出此菌。隨著人們西式餐飲方式的增加，本菌引起的食物中毒在全世界越來越多。O157 H7主要存在於未煮熟煮透煮的牛肉等食品中，所以，煮熟肉、奶等食品，才可以減少O15 H7食物中毒的發生。

⑩ 大腸桿菌O157:H7 中的O,和H分別表示什麼意思

O是指O抗原，也就是體細胞抗原，是包埋在細菌細胞壁中的脂多糖類；H是指H抗原，也就是鞭毛抗原，是蛋白質類，具有免疫性的結構。除此之外，還有K抗原，也就莢膜抗原，大部分是多糖；以及M抗原，類粘蛋白，多糖類。
大腸桿菌根據這四種不同抗原類型來進行血清學上的分類和分析。